Quando as pessoas pensam em clonagem, muitas vezes evocam imagens de cientistas altamente qualificados, microscópios, tubos de ensaio e laboratórios de alta tecnologia.
Felizmente, clonar cogumelos não é tão complicado, e você pode clonar facilmente seus cogumelos favoritos em casa sem equipamentos caros.
Neste artigo, explicamos por que você deve clonar cogumelos e fornecemos um guia passo a passo sobre como clonar cogumelos com ágar.
Também fornecemos respostas a perguntas frequentes sobre como clonar cogumelos.
O que significa clonar um cogumelo?
Quando você clona um cogumelo, você cria uma cópia idêntica de um cogumelo em particular usando um pedaço de tecido vivo ou carne do corpo de frutificação do cogumelo.
As pessoas usam o termo “clonagem” para descrever os diferentes processos usados para produzir cópias geneticamente idênticas de um organismo específico. Neste caso, um cogumelo.
As pessoas chamam a cópia geneticamente idêntica de clone.
Você pode cultivar cogumelos a partir de cogumelos frescos?
Sim, você pode cultivar cogumelos a partir de cogumelos frescos porque os cogumelos consistem em micélio bem compactado, o mesmo material em forma de fio que compõe a vasta porção subterrânea de um fungo.
Mesmo depois de colher um cogumelo, o micélio que compõe a carne do cogumelo ainda está vivo e capaz de se reproduzir.
Se você pegar um pouco do tecido vivo do cogumelo fresco e colocá-lo em um meio de cultivo rico em nutrientes, o micélio crescerá e se espalhará por todo o meio de cultivo.
Você pode usar este micélio para cultivar mais cogumelos.
Por que clonar cogumelos?
A clonagem permite que você crie uma cópia idêntica de um cogumelo com características desejáveis como rendimento, velocidade de crescimento, cor, adequação do substrato, resistência a doenças, etc.
Você pode clonar quaisquer cogumelos selvagens comestíveis e medicinais fabulosos que encontrar em sua área e cultivar mais deles.
A maioria das cepas de cogumelos comerciais populares de hoje se originou nas florestas.
E você também pode clonar cogumelos que você cultivou ou até mesmo cogumelos frescos comprados em lojas.
Embora você possa coletar esporos de cogumelos para propagação, seria arriscado.
Porque ao cultivar cogumelos a partir de esporos, os resultados são extremamente imprevisíveis.
Hifas unicelulares crescem a partir de esporos de cogumelos e, quando se fundem para criar micélio, criam milhares de novas linhagens.
Uma nova cepa terá características semelhantes ao cogumelo pai, mas pode se desenvolver de maneiras diferentes que a tornam menos desejável.
Nosso artigo, “Como os cogumelos se reproduzem?” tem mais informações sobre os processos envolvidos para passar de esporos a um corpo de frutificação de cogumelo.
A clonagem de cogumelos é mais rápida do que cultivar cogumelos a partir de esporos e mais fácil, pois nem sempre é fácil obter esporos viáveis.
Melhores cogumelos para clonar
Os melhores cogumelos para clonar são os saprófitos que crescem em material orgânico morto e em decomposição na natureza.
Você pode classificar os cogumelos pela forma como eles obtêm sua nutrição. Os três tipos mais comuns são os cogumelos saprotróficos, parasitas e micorrízicos.
Destes, apenas os cogumelos saprotróficos são fáceis de clonar e cultivar.
E alguns cogumelos saprotróficos são mais fáceis de clonar do que outros.
Cogumelos resistentes, de crescimento rápido e menos exigentes, como cogumelos ostra, shiitake e juba de leão, são alguns dos cogumelos mais fáceis de cultivar e clonar.
E os cogumelos grossos e carnudos, como shiitake, ostras-rei e cogumelos cremini, são mais fáceis de trabalhar na clonagem.
Mas não importa quais cogumelos você escolha clonar, é melhor usar cogumelos jovens ainda no estágio de botão.
Nesta fase de crescimento, os cogumelos crescem rapidamente e podem dobrar de tamanho diariamente.
Como clonar cogumelos com ágar passo a passo
A clonagem de cogumelos é mais fácil do que você imagina e basicamente envolve remover um pedaço de tecido de cogumelo e colocá-lo em um meio de cultivo rico em nutrientes.
A dificuldade é garantir que o tecido, o micélio e o meio de cultivo permaneçam não contaminados.
Há mais de uma maneira de clonar cogumelos, mas clonar cogumelos usando ágar é uma das melhores maneiras de evitar a contaminação.
Aqui estão os passos a seguir para clonar cogumelos com ágar.
Etapa 1:reunir suprimentos
Antes de começar, você precisa reunir todos os suprimentos necessários, incluindo:
- Placas de ágar
- Corpo de frutificação de cogumelo
- Uma capela de fluxo laminar, Still Air Box ou ambiente limpo semelhante
- Pano embebido em álcool
- Um bisturi
- Um queimador de álcool ou uma fonte de chama constante para esterilizar a lâmina
- Rede de cabelo, máscara facial e luvas
- Parafilme ou fita adesiva
- Marcador permanente
Placas de ágar
As placas de ágar são placas de Petri que contêm uma solução de ágar estéril rica em nutrientes.
A solução de ágar fornece os nutrientes necessários para o micélio crescer no ambiente estéril dentro das placas de Petri.
O ágar é uma substância orgânica gelatinosa produzida a partir de algas vermelhas com muitas aplicações culinárias e conservantes.
As placas de ágar permitem que você armazene seu micélio de cogumelo por longos períodos.
Eles também ajudam a reduzir as chances de contaminação e oferecem a oportunidade de remover quaisquer contaminantes e obter uma cultura de cogumelos limpa.
Você pode comprar placas de ágar on-line ou, se quiser mais desafios, obter ágar em pó e fazer seu próprio meio de cultivo de ágar.
Mas, para isso, você precisará do equipamento certo para garantir condições estéreis para que a solução de ágar não seja contaminada.
Se você é novo na clonagem de cogumelos, recomendamos evitar esta etapa. Em vez disso, compre placas de ágar pré-derramadas e prontas para uso.
Estes são produzidos especialmente para o cultivo de cogumelos e são extremamente convenientes.
Corpo de Frutificação de Cogumelo
Ao clonar, é melhor usar um corpo de frutificação de cogumelo fresco e saudável.
E embora os cogumelos mais jovens possam colonizar mais rapidamente, tente selecionar um corpo de frutificação relativamente grande.
É mais difícil obter amostras de tecido limpas de cogumelos muito pequenos ou de polpa fina.
Se você não conseguir clonar o cogumelo imediatamente após a colheita, poderá armazená-lo na geladeira por até 48 horas.
Tente armazenar seu cogumelo pelo menor tempo possível, pois é mais difícil germinar micélio de cogumelos mais velhos.
E, quanto mais tempo você os armazenar, maior o risco de contaminação.
Capuz de fluxo laminar ou caixa de ar parado (SAB)
Recomendamos a clonagem na frente de uma capela de fluxo laminar para evitar que o ágar seja contaminado com mofo e esporos de bactérias no ar.
As coifas de fluxo laminar fornecem um fluxo constante e ininterrupto de ar limpo filtrado e reduzem significativamente as chances de contaminação.
Mas, se você é novo na clonagem de cogumelos, também pode usar uma caixa de ar esterilizada (SAB).
Ou até mesmo um espaço fechado com fluxo de ar mínimo, como um banheiro.
Nesse caso, use bastante spray desinfetante para reduzir o número de esporos no ar.
Etapa 2:prepare seu espaço de trabalho
Ao clonar cogumelos, um ambiente de trabalho limpo e estéril é essencial para o sucesso.
Certifique-se de limpar as mãos, o bisturi e quaisquer outras ferramentas antes de começar.
Considere usar uma máscara facial, rede de cabelo e luvas, pois isso ajuda a evitar que contaminantes de sua respiração, mãos ou cabelo caiam na placa.
Você também precisará limpar e desinfetar as superfícies de trabalho na frente do exaustor de fluxo laminar ou ao redor do seu SAB.
Coloque a placa de ágar o mais próximo possível da frente da capela de fluxo.
Procure fazer o resto do processo a favor do vento da placa de ágar para ajudar a evitar a contaminação.
Etapa 3:Limpe e rasgue o cogumelo aberto
Primeiro, você precisa limpar seu corpo de frutificação de cogumelos usando um pano embebido em álcool ou uma toalha de papel.
Limpe completamente a parte externa do cogumelo, pois é mais do que provável que esteja coberto de contaminantes que podem acabar na placa de ágar.
Uma vez que o cogumelo esteja limpo, você precisa rasgá-lo na frente da capa de fluxo, mas a jusante da placa de ágar.
Sempre rasgue a fruta em vez de cortá-la para ajudar a evitar a contaminação.
Se você cortar o cogumelo, a ponta da faca pode empurrar os contaminantes do lado de fora para o centro do cogumelo.
O interior de um cogumelo rasgado é naturalmente estéril e contém células limpas de micélio de cogumelos férteis.
Etapa 4:esterilize seu bisturi com calor
Ao clonar, você usará um bisturi para remover uma amostra de tecido do cogumelo, e esse bisturi precisa ser esterilizado em chamas até ficar vermelho brilhante.
Você terá que esterilizar o bisturi entre cada transferência de tecido, então é melhor ter uma chama constante em sua bancada.
A melhor maneira de conseguir isso é com uma lâmpada ou queimador de álcool, mas você também pode usar um copo cheio de três quartos de álcool isopropílico.
Se você seguir esse caminho, tome cuidado para não derrubar o copo enquanto estiver queimando.
Certifique-se de que o bisturi esteja frio antes de remover o tecido do cogumelo, pois qualquer calor pode matar o tecido.
Uma maneira de resfriar o bisturi é mergulhá-lo na solução de ágar. Para fazer isso, levante a tampa da placa de Petri, mergulhe a lâmina no ágar perto da borda e recoloque a tampa rapidamente.
Você ouvirá um chiado audível enquanto a lâmina esfria.
Outra maneira de garantir que o bisturi esfrie é aquecê-lo antes de rasgar o cogumelo e deixá-lo esfriar no fluxo de ar do exaustor.
Fazer isso não é recomendado se você usar um SAB para clonagem, pois a lâmina pode ficar contaminada.
Etapa 4:remova e transfira o tecido
Todo o corpo de frutificação do cogumelo consiste em micélio denso, e você pode pegar tecido para clonagem de qualquer parte do cogumelo.
Mas, algumas áreas são melhores para clonagem do que outras.
Quando se trata de coletar células reprodutivas, as melhores partes a serem usadas são:
- A parte carnuda no meio do bumbum da haste
- O meio da haste superior logo abaixo da tampa
- Debaixo da tampa perto das guelras
É melhor não clonar usando tecido branquial, pois as brânquias são difíceis de limpar e geralmente contêm esporos que podem germinar e fornecer uma cepa diferente.
Remova o tecido raspando o bisturi na carne algumas vezes ou cortando um pequeno pedaço de tecido de 3 x 3 mm.
Empalar o tecido no bisturi, movê-lo a montante da placa de ágar, remover a tampa e colocar o tecido no ágar. Em seguida, feche a placa de Petri imediatamente.
Execute as etapas acima de forma suave e rápida para minimizar o tempo em que a placa de ágar fica aberta, especialmente se você estiver usando um SAB para sua clonagem.
Repita o processo mais duas vezes, esterilizando o bisturi a cada vez até que você tenha três pedaços de tecido na placa de ágar.
O uso de mais de uma peça é opcional e muitas pessoas colocam apenas uma amostra de tecido por placa de ágar.
Mas ter mais pedaços de tecido oferece maiores chances de sucesso, pois as amostras nem sempre crescem.
Etapa 5:selar, incubar e limpar
Sele suas placas de ágar inoculadas com parafilme ou fita adesiva e rotule-as com a espécie e a data de inoculação.
O parafilm é ideal, pois garante que as placas de ágar ainda possam respirar, mantendo uma vedação firme.
Coloque as placas de ágar seladas em um local com temperatura ambiente longe da luz solar direta para incubar.
Quanto tempo um clone leva para crescer em ágar?
Dentro de 2 a 3 dias, você deve ver o micélio começando a crescer para fora do tecido.
Às vezes, se você tiver sorte, obterá uma cultura de cogumelos limpa na primeira vez.
Mas muitas vezes, haverá manchas de fungos pretos ou verdes crescendo em seu prato, sinais de contaminação.
Se isso acontecer, use as etapas acima para remover um pedaço de micélio não contaminado da placa contaminada e coloque-o em uma nova placa de ágar limpa.
Pode ser necessário repetir esse processo algumas vezes até obter uma cultura de cogumelos limpa.
Etapa 6:armazene sua cultura de cogumelos
Pouco antes de o micélio atingir a borda da placa de ágar, você precisa usá-lo ou armazená-lo.
Se você esperar muito tempo, o micélio pode crescer através do parafilme ou da fita adesiva e se contaminar.
Você pode armazenar a maioria das culturas de cogumelos ágar na geladeira por longos períodos, até um ano ou mais, e eles permanecerão viáveis.
Mas algumas culturas de cogumelos, como cogumelos ostra rosa, não sobreviverão se colocadas na geladeira.
Portanto, é sempre melhor fazer alguma pesquisa e descobrir como armazenar seu tipo específico de cultura de cogumelos.
Como clonar cogumelos sem ágar
Existem várias maneiras de clonar cogumelos sem ágar, mas eles geralmente têm maiores chances de contaminação.
Mas, para os cultivadores de cogumelos iniciantes, que desejam aprender mais sobre como os cogumelos crescem, algumas dessas técnicas são divertidas de experimentar.
Aqui estão algumas das maneiras de clonar cogumelos sem ágar:
1. Clonar cogumelos diretamente em potes de grãos esterilizados
Para clonar cogumelos usando grãos, você seguiria todos os passos acima, mas em vez de usar placas de ágar, você usaria potes de grãos esterilizados chamados de semente de grãos.
Não é tão bom quanto clonar em placas de ágar, porque você não pode ver infecções tão facilmente como em uma superfície de ágar 2D, mas pode ser feito.
Você pode usar vários tipos de grãos para clonar cogumelos, incluindo pipoca, trigo, centeio, arroz integral e branco e até sementes de pássaros selvagens.
Mas, a maioria dos produtores de cogumelos concorda que um dos melhores grãos para usar é o centeio.
O centeio é geralmente fácil de obter, tem todos os nutrientes que os cogumelos precisam e absorve bem a água.
Você pode encomendar seus potes de desova de grãos on-line ou fazer o seu próprio em casa.
Fazer o seu próprio envolve enxaguar o grão para limpá-lo, mergulhá-lo em água por 12 a 24 horas e depois cozinhar o grão para que absorva mais água.
Depois disso, você precisa drenar e remover o excesso de água antes de colocar os grãos em potes de pedreiro e esterilizá-los em uma panela de pressão.
2. Clonagem de cogumelos usando papelão esterilizado
Algumas pessoas clonam cogumelos em papelão esterilizado em vez de ágar ou grãos.
Com esse método, as chances de contaminação são maiores e o rendimento menor, pois o papelão não é uma fonte de alimento rica em nutrientes.
Além disso, só funcionará com tipos menos exigentes de cogumelos, como cogumelos ostra que crescem em uma variedade de substratos.
Este método de clonagem segue os passos acima com algumas variações.
Em vez de colocar o tecido em ágar, você o empurra nas costelas do papelão preparado e esterilizado e depois coloca o papelão inoculado em um frasco esterilizado para crescer.
3. O método de clonagem da extremidade da haste
Este método é uma maneira simples e de baixa tecnologia de cultivar mais cogumelos usando pontas de caule de cogumelos selvagens ou comprados em lojas.
É uma técnica de clonagem barata e fácil que não consome muito tempo e não precisa de equipamentos especializados.
Mas esse método só funciona com tipos de cogumelos resistentes e menos exigentes.
Nosso artigo, “Como cultivar seu próprio desova de cogumelos DIY” tem instruções passo a passo sobre como clonar cogumelos-ostra usando o método de haste.
Você também pode usar cavilhas de madeira bem encharcadas para cultivar cogumelos a partir de pontas de caule.
E dependendo do tipo de cogumelo, você pode até cultivar cogumelos ao ar livre com pontas de caule.
Tente colocar pontas de haste de cogumelo diretamente em um canteiro de cogumelos ao ar livre ou em uma espessa camada de composto para crescer.
Como você clona cogumelos secos?
Clone cogumelos secos embebendo um pedaço de tecido de cogumelo seco em água destilada estéril por até um dia e depois transferindo-o para um meio de cultivo estéril.
Cogumelos que são secos ao calor podem não crescer, pois temperaturas excessivas durante o processo de secagem geralmente matam o micélio.
Em geral, a clonagem de um cogumelo seco não é tão confiável quanto o uso de tecido vivo recém-colhido, mas é possível.
Para clonar um cogumelo seco, siga os passos acima, mas adicione um passo para reidratar o cogumelo seco.
Depois de rasgar o cogumelo seco em um ambiente estéril, use um bisturi para remover um pedaço de tecido e, em seguida, mergulhe o pedaço para reidratá-lo antes de transferi-lo para a placa de ágar.
Perguntas frequentes sobre clonagem de cogumelos
Aqui estão as respostas para algumas perguntas frequentes sobre a clonagem de cogumelos:
Você pode cultivar cogumelos a partir de mudas?
Sim, você pode cultivar cogumelos a partir de estacas e, embora possa usar qualquer parte carnuda de um cogumelo para alguns métodos de clonagem, o melhor corte a ser usado é a base do caule ou a extremidade do caule.
A melhor haste de haste para usar é uma fresca com algum substrato e micélio ainda ligado.
Eles chamam esse método de cultivo de cogumelos de método do rabo do caule.
Os cogumelos clonam a si mesmos?
Sim, os cogumelos clonam a si mesmos. Dependendo das circunstâncias, algumas espécies de cogumelos podem se reproduzir sexualmente e assexuadamente.
E quando os cogumelos usam a reprodução assexuada, eles criam clones de si mesmos.
Mas, geralmente, os cogumelos são os órgãos reprodutivos acima do solo que os fungos usam para ajudar a distribuir os esporos como parte da reprodução sexual.
Como você coleta micélio?
Para coletar micélio, use um bisturi esterilizado por chama para raspar ou cortar um pouco de tecido de cogumelo do centro de um cogumelo fresco ou seco.
Os corpos de frutificação dos cogumelos consistem em micélio bem compactado, e qualquer tecido fresco retirado de cogumelos contém micélio vivo.
Você pode clonar um cogumelo clone?
Sim, você pode clonar um cogumelo clone. Mas se você clonar clones continuamente, o micélio eventualmente enfraquece.
O micélio enfraquecido coloniza um substrato mais lentamente ou para de produzir corpos de frutificação.
Você pode clonar cogumelos para sempre?
Não, você não pode clonar cogumelos para sempre. Toda vez que você transfere tecido e clona um cogumelo clone, ele se move um passo adiante do cogumelo original.
Eventualmente, desenvolverá uma mutação genética que reduz a viabilidade da cultura.
Considerações finais
Se você deseja replicar uma espécie selvagem fascinante ou copiar seu cogumelo cultivado favorito, a clonagem é uma habilidade valiosa para aprender.
A clonagem de cogumelos envolve remover um pedaço de tecido de cogumelo e colocá-lo em um meio de cultivo rico em nutrientes.
Existem várias maneiras diferentes de clonar cogumelos. Alguns são projetos divertidos para iniciantes, enquanto outros precisam de mais experiência.
Para saber mais sobre o cultivo de cogumelos de maneira low-tech, visite nosso Mushroom Growing Hub.
